互利的供方关系:组织与其供方是相互依存的,互利的关系可增强双方创造价值的能力。
基于事实的决策方法:有效决策是建立在数据和信息分析基础上。
持续改进:组织总体业绩的持续改进应是组织的一个永恒的目标。
管理的系统方法:识别、理解和管理作为体系的相互关联的过程,有助于组织实现其目标的效率和有效性。
过程方法:将相关的活动和资源作为过程进行管理,可以更高效地得到期望的结果。
全员参与:各级人员是组织之本,只有他们的充分参与,才能使他们的才干为组织获益。
领导作用:***确立本组织统一的宗旨和方向。他们应该创造并保持使员工能充分参与实现组织目标的内部环境。
以顾客为关注焦点:组织依存于其顾客。因此组织应理解顾客当前和未来的需求,满足顾客并争取超越顾客期望。
显微镜的使用方法与步骤 一、取镜和安放 1.右手握住镜臂,左手托住镜座。 2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右 处)。安装好目镜和物镜。 二、对光 3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。 4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。 三、观察 5.把所要观察的玻片标本(也可以用印有“6”字的薄纸片制成)放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。 6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。 7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 8.高倍物镜的使用:使用高倍物镜之前,必须先用低倍物镜找到观察的物象,并调到视野的正中央,然后转动转换器再换高倍镜。换用高倍镜后,视野内亮度变暗,因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面,然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少,但是体积变大。 四、整理 8.实验完毕,把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器,把两个物镜偏到两旁,并将镜筒缓缓下降到**处,反光镜竖直放置。**把显微镜放进镜箱里,送回原处。 《注意事项》: 1、严忌单手提取显微镜。 2、若须移动显微镜,务必将显微镜提起再放至适当位置,严忌推动显微镜(推动时造成的震动可能会导致显微镜内部零件的松动,切记!!),使用显微镜请务必小心轻放。 3、使用显微镜时坐椅的高度应适当,观察时更应习惯两眼同时观察,且光圈及光源亮度皆应适当,否则长时间观察时极易感觉疲劳。 4、转动旋转盘时务必将载物台降至**点,以免因操作不当而刮伤接目镜之镜头。 5、标本染色或其它任何操作皆应将玻片取下,操作完成后再放回载物台观察,切勿在载物台上操作,以免染剂或其它液体流入显微镜内部或伤及镜头。 6、观察完一种材料,欲更换另一种材料时,务必将载物台下降至**点,换好玻片后再依标准程序重新对焦,切勿直接抽换标本,以免刮伤镜头或玻片标本。 7、用毕显微镜应将载物台下降至**点,并将低倍镜对准载物台中央圆孔处,将电源线卷好,盖上防尘罩,并收入存放柜中。
2016年12月31日/生物谷BIOON/---光学显微镜的**目标是改善这种方法的分辨率以至于一个人能够单个地区分彼此间挨得非常近的分子。如今,来自德国马克斯-普朗克生物物理化学研究所的诺贝尔奖得主Stefan Hell和同事们实现了长期以来被认为是不可能实现的目标:他们开发出一种新的被称作MINFLUX的荧光显微镜,从而**允许利用光学手段区分彼此间相隔几纳米的分子。这种显微镜在分辨率上要比常规的光学显微镜高出100倍,而且甚至超过迄今为止**的超分辨率光学显微镜--- Hell开发的STED和诺贝尔奖得主Eric Betzig描述的PALM/STORM ---高达20倍。对MINFLUX而言,Hell以一种全新的概念结合了STED和PALM/STORM的优势。这一突破为科学家们在分子水平上研究生命如何发挥功能提供新的机会。相关研究结果于2016年12月22日在线发表在Science期刊上,论文标题为“Nanometer resolution imaging and tracking of fluorescent molecules with minimal photon fluxes”。Hell解释道,“我们利用MINFLUX实现1纳米的分辨率,这是单个分子的直径---在荧光显微镜中可能实现的*终分辨率限制。我深信MINFLUX显微镜有潜力成为细胞生物学*为基础的工具之一。基于此,在分子细节上绘制细胞图谱和实时观察它们内部快速发生的过程将是可能的。这可能能够在我们了解活细胞中发生的分子过程方面引发变革。”Hell长期以来深信利用经常使用的聚焦光线和常规透镜,荧光显微镜分辨率能够增加到单分子水平。事实上,物理学家Ernst Abbe在1873年提出光学显微镜的分辨率限制在光的波长的一半,大约是200纳米。100多年后,这种阿贝限制(Abbe limit)仍然是有效的。然而,Hell是第一个证实这种限制能够被STED显微镜克服:他1994年想出这种方法,在5年后,实验性地构建出这种STED显微镜。STED以及5年后开发的PALM/STORM实际上达到大约20~30纳米的分辨率---大约比这种阿贝限制好10倍。由于开发这些超高分辨率显微镜技术,Hell和Betzig一起在2014年获得诺贝尔化学奖。将STED和PALM/STORM的优势结合在一起STED和PALM/STORM通过一个接一个地开启和关闭相邻的荧光分子,这样它们有序地发出荧光,从而将它们区分开来。然而,这两种方法在一个关键点上存在差异:STED显微镜利用一种圆环形的激光束在样品中的固定位置---除圆环中心之外的聚焦区域中的任何一个位置---上关闭分子荧光。它的优势在于这种圆环形激光束精确地确定对应的荧光分子位于空间中的哪个点上。它的劣势在于事实上,这种激光束并不足够强,因而不能够将发出的荧光局限在这种圆环中心的单个分子上。另一方面,就PALM/STORM而言,它能够在分子水平上和在随机的位置上进行开启和关闭。它的优势在于人们已能够在单分子水平上进行检测,但是它的劣势在于人们并不能够知道分子在空间中的精确位置。这些位置不得不通过在照相机上尽可能多收集荧光光子方能找出;获得不到10纳米的分辨率需要50,000多个检测到的光子。因此,人们不能够实现分子水平(一纳米)的分辨率。在一种新的概念中,Hell想要将这两种方法的优势独特地结合在一起。“这个任务是微不足道的。但是,我的同事Francisco Balzarotti、Yvan Eilers和Klaus Gwosch在同我一起利用实验实现这种想法上做了出色的工作。”与PALM/STORM一样,MINFLUX随机地开启和关闭单个分子。然而,与此同时,它们的精确位置可通过类似于STED中的圆环形激光束加以确定。不同于STED的是,这种圆环形激光束在MINFLUX中激发荧光产生。如果这个分子位于圆环表面上的话,它将发出荧光;如果它正好位于昏暗的圆环中心的话,它不会发光荧光,但是人们能够发现它的精确位置。Balzarotti开发出一种聪明的算法以至于这种位置能够非常快速地和高精度地被确定出来。这位年轻的科学家解释道,“利用这种算法,探究圆环形激发光束的潜力是可能的。”获得分子分辨率图片的Gwosch补充道,“这真是令人难以置信,我们**能够利用MINFLUX在几纳米尺度上区分细节。”分辨率提高100倍除了实现分子分辨率外,将STED和PALM/STORM结合在一起也提供另一种主要优势:Hell声称,“相比而言,MINFLUX更加快速。鉴于它利用一种圆环形激光束工作,相比于PALM/STORM而言,在获得每个分子*终的分辨率上,它需要更低的光信号或者说更少的荧光光子。”人们已经能够利用STED实时地记录活细胞内部的影像。但是,正如Eilers所强调的那样,如今,在一种时间分辨率提高100倍的情形下追踪细胞中的分子运动是可能的。他**成功地利用MINFLUX以一种****的时空分辨率拍摄出活的大肠杆菌中分子运动的影像。Eilers说,“就速度而言,我们还没有充分利用MINFLUX。”研究人员深信在未来,能够研究活细胞中极其快速发生的变化,比如细胞纳米机器的运动,或者蛋白折叠。
显微镜的使用方法与步骤 一、取镜和安放 1.右手握住镜臂,左手托住镜座。 2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右 处)。安装好目镜和物镜。 二、对光 3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。 4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。 三、观察 5.把所要观察的玻片标本(也可以用印有“6”字的薄纸片制成)放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。 6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。 7.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 8.高倍物镜的使用:使用高倍物镜之前,必须先用低倍物镜找到观察的物象,并调到视野的正中央,然后转动转换器再换高倍镜。换用高倍镜后,视野内亮度变暗,因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面,然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少,但是体积变大。 四、整理 8.实验完毕,把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器,把两个物镜偏到两旁,并将镜筒缓缓下降到**处,反光镜竖直放置。**把显微镜放进镜箱里,送回原处。 《注意事项》: 1、严忌单手提取显微镜。 2、若须移动显微镜,务必将显微镜提起再放至适当位置,严忌推动显微镜(推动时造成的震动可能会导致显微镜内部零件的松动,切记!!),使用显微镜请务必小心轻放。 3、使用显微镜时坐椅的高度应适当,观察时更应习惯两眼同时观察,且光圈及光源亮度皆应适当,否则长时间观察时极易感觉疲劳。 4、转动旋转盘时务必将载物台降至**点,以免因操作不当而刮伤接目镜之镜头。 5、标本染色或其它任何操作皆应将玻片取下,操作完成后再放回载物台观察,切勿在载物台上操作,以免染剂或其它液体流入显微镜内部或伤及镜头。 6、观察完一种材料,欲更换另一种材料时,务必将载物台下降至**点,换好玻片后再依标准程序重新对焦,切勿直接抽换标本,以免刮伤镜头或玻片标本。 7、用毕显微镜应将载物台下降至**点,并将低倍镜对准载物台中央圆孔处,将电源线卷好,盖上防尘罩,并收入存放柜中。...